冷凍干燥技術(shù)原理

   冷凍干燥技術(shù)原理

干燥是保持物質(zhì)不致腐敗變質(zhì)的方法之一。干燥的方法有許多，如曬干、煮干、烘干、噴霧干燥和真空干燥等。但這些干燥方法都是在0℃以上或更高的溫度下進(jìn)行。干燥所得的產(chǎn)品，一般是體積縮小、質(zhì)地變硬，有些物質(zhì)發(fā)生了氧化，一些易揮發(fā)的成分大部分會(huì )損失掉，有些熱敏性的物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、維生素會(huì )發(fā)生變性。微生物會(huì )失去生物活力，干燥后的物質(zhì)不易在水中溶解等。因此干燥后的產(chǎn)品與干燥前相比在性狀上有很大的差別。而冷凍干燥法不同于以上的干燥方法，產(chǎn)品的干燥基本上在0℃以下的溫度進(jìn)行，即在產(chǎn)品凍結的狀態(tài)下進(jìn)行，直到后期，為了進(jìn)一步降低干燥產(chǎn)品的殘余水份含量，才讓產(chǎn)品升至0℃以上的溫度，但一般不超過(guò)40℃。

冷凍干燥就是把含有大量水分物質(zhì)，預先進(jìn)行降溫凍結成固體，然后在真空的條件下使水蒸汽直接升華出來(lái)。而物質(zhì)本身剩留在凍結時(shí)的冰架子中，因此它干燥后體積不變，疏松多孔。在升華時(shí)凍結產(chǎn)品內的冰或其它溶劑要吸收熱量。引起產(chǎn)品本身溫度的下降而減慢升華速度，為了增加升華速度，縮短干燥時(shí)間，必須要對產(chǎn)品進(jìn)行適當加熱。整個(gè)干燥是在較低的溫度下進(jìn)行的。

冷凍干燥有下列優(yōu)點(diǎn)：

⑴冷凍干燥在低溫下進(jìn)行，因此對于許多熱敏性的物質(zhì)特別適用。如蛋白質(zhì)、微生物之類(lèi)不會(huì )發(fā)生變性或失去生物活力。因此在醫藥上得到廣泛地應用。

⑵在低溫下干燥時(shí)，物質(zhì)中的一些揮發(fā)性成分損失很小，適合一些化學(xué)產(chǎn)品、藥品和食品干燥。

⑶在冷凍干燥過(guò)程中，微生物的生長(cháng)和酶的作用無(wú)法進(jìn)行，因此能保持原來(lái)的性狀。

⑷由于在凍結的狀態(tài)下進(jìn)行干燥，因此體積幾乎不變，保持了原來(lái)的結構，不會(huì )發(fā)生濃縮現象。

⑸干燥后的物質(zhì)疏松多孔，呈海綿狀，加水后溶解迅速而完全，幾乎立即恢復原來(lái)的性狀。

⑹由于干燥在真空下進(jìn)行，氧氣極少，因此一些易氧化的物質(zhì)得到了保護。

⑺干燥能排除95-99％以上的水分，使干燥后產(chǎn)品能長(cháng)期保存而不致變質(zhì)。

因此，冷凍干燥目前在醫藥工業(yè)、食品工業(yè)、科研和其他部門(mén)得到廣泛的應用。

第二節  　凍干機的組成和凍干程序

產(chǎn)品的冷凍干燥需要在一定裝置中進(jìn)行，這個(gè)裝置叫做真空冷凍干燥機或冷凍干燥裝置，簡(jiǎn)稱(chēng)凍干機。

凍干機按系統分，由制冷系統、真空系統、加熱系統、和控制系統四個(gè)主要部分組成。按結構分，由凍干箱或稱(chēng)干燥箱、冷凝器或稱(chēng)水汽凝結器、制冷機、真空泵和閥門(mén)、電氣控制元件等組成。圖十三是凍干機組成示意圖。

凍干箱是一個(gè)能夠制冷到－55℃左右，能夠加熱到+80℃左右的高低溫箱，也是一個(gè)能抽成真空的密閉容器。它是凍干機的主要部分，需要凍干的產(chǎn)品就放在箱內分層的金屬板層上，對產(chǎn)品進(jìn)行冷凍，并在真空下加溫，使產(chǎn)品內的水分升華而干燥。

冷凝器同樣是一個(gè)真空密閉容器，在它的內部有一個(gè)較大表面積的金屬吸附面，吸附面的溫度能降到－40℃～－70℃以下，并且能維持這個(gè)低溫范圍。冷凝器的功用是把凍干箱內產(chǎn)品升華出來(lái)的水蒸氣凍結吸附在其金屬表面上。

凍干箱、冷凝器、真空管道、閥門(mén)、真空泵等構成凍干機的真空系統。真空系統要求沒(méi)有漏氣現象，真空泵是真空系統建立真空的重要部件。真空系統對于產(chǎn)品的迅速升華干燥是必不可少的。

制冷系統由制冷機與凍干箱、冷凝器內部的管道等組成。制冷機可以是互相獨立的二套或以上，也可以合用一套。制冷機的功用是對凍干箱和冷凝器進(jìn)行制冷，以產(chǎn)生和維持它們工作時(shí)所需要的低溫，它有直接制冷和間接制冷二種方式。

加熱系統對于不同的凍干機有不同的加熱方式。有的是利用直接電加熱法；有的則利用中間介質(zhì)來(lái)進(jìn)行加熱，由一臺泵(或加一臺備用泵)使中間介質(zhì)不斷循環(huán)。加熱系統的作用是對凍干箱內的產(chǎn)品進(jìn)行加熱，以使產(chǎn)品內的水分不斷升華，并達到規定的殘余含水量要求。

控制系統由各種控制開(kāi)關(guān)，指示調節儀表及一些自動(dòng)裝置等組成，它可以較為簡(jiǎn)單，也可以很復雜。一般自動(dòng)化程度較高的凍干機則控制系統較為復雜?？刂葡到y的功用是對凍干機進(jìn)行手動(dòng)或自動(dòng)控制，操縱機器正常運轉，以使凍干機生產(chǎn)出合乎要求的產(chǎn)品來(lái)。

冷凍干燥的程序：

⑴在凍干之前，把需要凍干的產(chǎn)品分裝在合適的容器內，一般是玻璃模子瓶、玻璃管子瓶或安瓶，裝量要均勻，蒸發(fā)表面盡量大而厚度盡量薄一些；

⑵然后放入與凍干箱板層尺寸相適應的金屬盤(pán)內。對瓶裝一般采用脫底盤(pán)，有利于熱量的有效傳遞。

⑶裝箱之前，先將凍干箱進(jìn)行空箱降溫，然后將產(chǎn)品放入凍干箱內進(jìn)行預凍；或者將產(chǎn)品放入凍干箱內板層上同時(shí)進(jìn)行預凍；

⑷抽真空之前要根據冷凝器制冷機的降溫速度提前使冷凝器工作，抽真空時(shí)冷凝器至少應達到－40℃的溫度；

⑸待真空度達到一定數值后（通常應達到13Pa～26Pa內的真空度），或者有的凍干工藝要求達到所要求的真空度后繼續抽真空1～2h以上；即可對箱內產(chǎn)品進(jìn)行加熱。一般加熱分兩步進(jìn)行，第一步加溫不使產(chǎn)品的溫度超過(guò)共熔點(diǎn)或稱(chēng)共晶點(diǎn)的溫度；待產(chǎn)品內水分基本干完后進(jìn)行第二步加溫，這時(shí)可迅速地使產(chǎn)品上升的規定的最高許可溫度。在最高許可溫度保持2h以上后，即可結束凍干。

整個(gè)升華干燥的時(shí)間約12～24h左右有的甚至更長(cháng)，與產(chǎn)品在每瓶?jì)鹊难b量，總裝量，玻璃容器的形狀、規格，產(chǎn)品的種類(lèi)，凍干曲線(xiàn)及機器的性能等等有關(guān)。

凍干結束后，要充入干燥無(wú)菌的空氣進(jìn)入干燥箱，然后盡快地進(jìn)行加塞封口，以防重新吸收空氣中的水分。

在凍干過(guò)程中，把產(chǎn)品和板層的溫度、冷凝器溫度和真空度對照時(shí)間劃成曲線(xiàn)，叫做凍干曲線(xiàn)。一般以溫度為縱坐標，時(shí)間為橫坐標。凍干不同的產(chǎn)品采用不同的凍干曲線(xiàn)。同一產(chǎn)品使用不同的凍干曲線(xiàn)時(shí)，產(chǎn)品的質(zhì)量也不相同，凍干曲線(xiàn)還與凍干機的性能有關(guān)。因此不同的產(chǎn)品，不同的凍干機應用不同的凍干曲線(xiàn)。圖十四是凍干曲線(xiàn)示意圖（其中沒(méi)有冷凝器的溫度曲線(xiàn)和真空度曲線(xiàn)）。

第三節  共溶點(diǎn)及其測量方法

需要凍干的產(chǎn)品，一般是預先配制成水的溶液或懸濁液，因此它的冰點(diǎn)與水就不相同了，水在0℃時(shí)結冰，而海水卻要在低于0℃的溫度才能結冰，因為海水也是多種物質(zhì)的水溶液。實(shí)驗指出:溶液的冰點(diǎn)將低于溶媒的冰點(diǎn)。

另外，溶液的結冰過(guò)程與純液體也不一樣，純液體如水在0℃時(shí)結冰，水的溫度并不下降，直到全部水結冰之后溫度才下降，這說(shuō)明純液體有一個(gè)固定的結冰點(diǎn)。而溶液卻不一樣，它不是在某一固定溫度完全凝結成固體，而是在某一溫度時(shí)，晶體開(kāi)始析出，隨著(zhù)溫度的下降，晶體的數量不斷增加，直到最后，溶液才全部凝結。這樣，溶液并不是在某一固定溫度時(shí)凝結。而是在某一溫度范圍內凝結。當冷卻時(shí)開(kāi)始析出晶體的溫度稱(chēng)為溶液的冰點(diǎn)。而溶液全部凝結的溫度叫做溶液的凝固點(diǎn)。凝固點(diǎn)就是融化的開(kāi)始點(diǎn)（即熔點(diǎn)），對于溶液來(lái)說(shuō)也就是溶質(zhì)和溶媒共同熔化的點(diǎn)。所以又叫做共熔點(diǎn)或共晶點(diǎn)?？梢?jiàn)溶液的冰點(diǎn)與共熔點(diǎn)是不相同的。共熔點(diǎn)才是溶液真正全部凝成固體的溫度。

顯然共熔點(diǎn)的概念對于冷凍干燥是重要的。因為凍干產(chǎn)品可能有鹽類(lèi)、糖類(lèi)、明膠、蛋白質(zhì)、血球、組織、病毒、細菌等等的物質(zhì)。因此它是一個(gè)復雜的液體，它的凍結過(guò)程肯定也是一個(gè)復雜的過(guò)程，與溶液相似，也有一個(gè)真正全部凝結成固體的溫度，即共熔點(diǎn)。由于冷凍干燥是在真空狀態(tài)下進(jìn)行的。只有產(chǎn)品全部?jì)鼋Y后才能在真空下進(jìn)行升華干燥，否則有部分液體存在時(shí)，在真空下不僅會(huì )迅速蒸發(fā)，造成液體的濃縮使凍干產(chǎn)品的體積縮??；而且溶解在水中的氣體在真空下會(huì )迅速冒出來(lái)，造成象液體沸騰的樣子，使凍干產(chǎn)品鼓泡、甚至冒出瓶外。這是我們所不希望的。為此凍干產(chǎn)品在升華開(kāi)始時(shí)必須要制冷到共熔點(diǎn)以下的溫度，使凍干產(chǎn)品真正全部?jì)鼋Y。

在凍結過(guò)程中，從外表的觀(guān)察來(lái)確定產(chǎn)品是否完全凍結成固體是不可能的；*測量溫度也無(wú)法確定產(chǎn)品內部的結構狀態(tài)。而隨著(zhù)產(chǎn)品結構發(fā)生變化時(shí)電性能的變化是極為有用的，特別是在凍結時(shí)電阻率的測量能使我們知道凍結是在進(jìn)行還是已經(jīng)完成了，全部?jì)鼋Y后電阻率將非常大，因此溶液是離子導電。凍結時(shí)離子將固定不能運動(dòng)，因此電阻率明顯增大。而有少量液體存在時(shí)電阻率將顯著(zhù)下降。因此測量產(chǎn)品的電阻率將能確定產(chǎn)品的共熔點(diǎn)。

正規的共熔點(diǎn)測量法是將一對白金電極浸入液體產(chǎn)品之中，并在產(chǎn)品中插一支溫度計，把它們冷卻到－40℃以下的低溫，然后將凍結產(chǎn)品慢慢升溫。用惠斯頓電橋來(lái)測量其電阻，當發(fā)生電阻突然降低時(shí)，這時(shí)的溫度即為產(chǎn)品的共熔點(diǎn)。電橋要用交流電供電，因為直流電會(huì )發(fā)生電解作用，整個(gè)過(guò)程由儀表記錄（圖十六）。

也可用簡(jiǎn)單的方法來(lái)測量，如圖十五所示。用二根適當粗細而又互相絕緣的銅絲插入盛放產(chǎn)品的容器中，作為電極。在銅電極附近插入一支溫度計，插入深度與電極差不多，把它們一起放入凍干箱內的觀(guān)察窗孔附近，并用適當方法把它們固定好，然后與其他產(chǎn)品一起預凍，這時(shí)我們用萬(wàn)用表不斷地測量在降溫過(guò)程中的電阻數值，根據電阻數值的變化來(lái)確定共熔點(diǎn)。

把電極引線(xiàn)通過(guò)一個(gè)開(kāi)關(guān)與萬(wàn)用表相連，可以不分正負極。如果凍干箱沒(méi)有電線(xiàn)引出接頭，則可以用二根細導線(xiàn)從箱門(mén)縫處引出，在電線(xiàn)附近涂些真空密封蠟，這樣不致于影響真空度。待溫度計降至0℃之后即開(kāi)始測量并作記錄。把萬(wàn)用表的轉換開(kāi)關(guān)放在測量電阻的最高檔（×1K或×10K）。由于萬(wàn)用表內使用的是直流電，為了防止電解作用，在每次測量完之后要把開(kāi)關(guān)立即關(guān)掉，把每一次測量的溫度和電阻數值一一記錄下來(lái)。開(kāi)始時(shí)電阻值很小，以后逐步增高。到某一溫度時(shí)電阻突然增大，幾乎是無(wú)窮大，這時(shí)的溫度值便是共熔點(diǎn)數值。

用這種方法測量的共熔點(diǎn)有一定的誤差，因為銅電極處多少有些電解作用。萬(wàn)用表對于高阻值沒(méi)有電橋靈敏；另外，凍結過(guò)程與熔化過(guò)程電阻的變化情況并不完全相同，但所測之值仍有實(shí)用參考價(jià)值。

共熔點(diǎn)的數值從0℃到－50℃不等，與產(chǎn)品的品種、保護劑的種類(lèi)和濃度有關(guān)。一些物質(zhì)的共熔點(diǎn)列表二十二供參考，因實(shí)際的凍干產(chǎn)品還有其它成份。所以與此不相同。

　表二十二　一些物質(zhì)的共熔點(diǎn)（℃）

第四節 凍干產(chǎn)品的崩解溫度

對于凍干產(chǎn)品的共熔點(diǎn)大家已經(jīng)熟悉了，它就是產(chǎn)品的真正固化點(diǎn)。也就是產(chǎn)品在抽真空前必須冷卻到的那個(gè)溫度點(diǎn)，不然產(chǎn)品在抽空時(shí)將會(huì )起泡，在升華加熱的時(shí)候也不能使產(chǎn)品超過(guò)這個(gè)溫度，不然產(chǎn)品將熔化。因此，共熔點(diǎn)是在預凍階段和升華階段需要進(jìn)行控制的溫度值。

現在引入一個(gè)崩解溫度的概念，它是不同于共熔點(diǎn)的另外一個(gè)溫度。

一個(gè)正常升華的產(chǎn)品，當升華進(jìn)行到一定的時(shí)候，就會(huì )出現上層的干燥層和下層的凍結層，這二層之間的交界面就是升華面，升華面是隨著(zhù)升華的進(jìn)行而不斷下降的。

已經(jīng)干燥的產(chǎn)品應該是疏松多孔，并保持在這一穩定的狀態(tài)，以便下層凍結產(chǎn)品升華出來(lái)的水蒸汽能順利地通過(guò)，使全部產(chǎn)品都得到良好的干燥。

但某些已經(jīng)干燥的產(chǎn)品當溫度升高到某一數值時(shí)，會(huì )失去剛性，變得有粘性，發(fā)生類(lèi)似塌方的崩解現象，使干燥產(chǎn)品失去疏松多孔的狀態(tài)，封閉了下層凍結產(chǎn)品水蒸汽的逸出通路，妨礙了升華的繼續進(jìn)行。

于是，升華速率變慢，從凍結產(chǎn)品吸收升華熱也隨之減少，由板層供給的熱量將有多余，這樣便引起凍結產(chǎn)品的溫度上升，當溫度升高到共熔點(diǎn)以上的溫度時(shí)，產(chǎn)品就會(huì )發(fā)生熔化或發(fā)泡現象，致使凍干失敗。

發(fā)生崩解時(shí)的溫度叫做該產(chǎn)品的崩解溫度。對于這樣的產(chǎn)品要獲得良好的干燥，只有保持升華中的干燥產(chǎn)品的溫度在崩解點(diǎn)以下，直到凍結產(chǎn)品全部升華完畢為止，才能使產(chǎn)品溫度繼續上升。這時(shí)由于產(chǎn)品中已不存在凍結冰，干燥產(chǎn)品即使發(fā)生崩解也不會(huì )影響產(chǎn)品的干燥，因為產(chǎn)品已從升華階段轉入解吸干燥階段。

沒(méi)有發(fā)生崩解的干燥產(chǎn)品與發(fā)生崩解的干燥產(chǎn)品在外觀(guān)上用肉眼看不出有什么差別，只有在顯微鏡下才能看到結構上的變化。當在顯微鏡下觀(guān)察產(chǎn)品的冷凍干燥過(guò)程時(shí)，如果看到發(fā)生崩解現象，那么這時(shí)的溫度就是該產(chǎn)品的崩解溫度。

有些產(chǎn)品的崩解溫度高于共熔點(diǎn)溫度，那么升華時(shí)僅需控制產(chǎn)品溫度低于共熔點(diǎn)溫度就行了；但有些產(chǎn)品的崩解溫度低于共熔點(diǎn)溫度，那么按照一般的方法控制升華時(shí)就可能發(fā)生崩解現象，這樣的產(chǎn)品只有在較低的溫度下進(jìn)行升華，因此必須延長(cháng)凍干時(shí)間。

產(chǎn)品的共熔點(diǎn)可以通過(guò)電阻法、差示熱分析法和低溫顯微鏡直接觀(guān)察法得知，但產(chǎn)品的崩解溫度只有在冷凍干燥顯微鏡下直接觀(guān)察才能得知。

產(chǎn)品的崩解溫度取決于產(chǎn)品本身的品種和保護劑的種類(lèi)；混合物質(zhì)的崩解溫度取決于各組分的崩解溫度。因此在選擇產(chǎn)品的凍干保護劑時(shí)，應選擇具有較高崩解溫度的材料，使升華干燥能在不很低的溫度下進(jìn)行，以節省凍干的能耗和時(shí)間，提高生產(chǎn)率。

甘氨酸、甘露醇、葡聚糖、木糖醇、聚已烯吡咯烷酮和蛋白質(zhì)混合物等保護劑能提高產(chǎn)品的崩解溫度。一些物質(zhì)的崩解溫度℃見(jiàn)表二十三

表二十三  一些物質(zhì)的崩解溫度℃